qPCR仪 Tm校准的影响因素及结果分析

qPCR仪 T_m校准的影响因素及结果分析

许俊然1  祝天宇2(通讯作者)  叶翠香1  林长春1

(1.广东省汕尾市质量计量监督检测所；2.北京林电伟业电子技术有限公司)

摘 要：qPCR仪熔解曲线校准在物理参数层面，可更加直观地反应荧光定量 PCR 仪温控及光学系统的可靠性及相互影响，是全面评估荧光定量PCR 仪的校准手段。由于熔解过程中,预熔解至熔解阶段的温度爬升速率不同,导致校准结果差异。因此,本文通过实验设计，分析了不同熔解爬升速率条件下T_m校准结果的差异和熔解曲线校准法的注意事项,为qPCR综合物参数校准提供了参考。

关键词：荧光定量PCR仪；解曲线；熔解温度；解速率